HLA-Mismched Transplantacja Nerek bez Utrzymywania Immunosupresji ad

Doustną cyklosporynę A (Neoral) podawano pooperacyjnie w dawce 8 do 12 mg na kilogram na dzień, przy docelowym minimalnym stężeniu we krwi od 250 do 350 ng na mililitr; dawka była stożkowa i przerywana przez kilka miesięcy. Protokół zmodyfikowano po leczeniu trzeciego pacjenta (patrz rozdział Wyniki), aby włączyć podawanie rytuksymabu, 375 mg na metr kwadratowy powierzchni ciała w dniach -7 i -2; i prednizon, 2 mg na kilogram na dzień, począwszy od dnia przeszczepu z zwężeniem w ciągu następnych 10 dni.
Pisemną świadomą zgodę uzyskano od wszystkich dawców i biorców. Wszystkie protokoły leczenia zostały zatwierdzone przez instytucjonalną komisję rewizyjną Massachusetts General Hospital i opracowane we współpracy z Immunologiczną Siecią Tolerancji Narodowego Instytutu Zdrowia.
Immunologiczne testy in vitro
Mieszana reakcja limfocytów i testy limfocytów z udziałem komórek, w których biorą udział komórki jednojądrzaste krwi obwodowej biorcy, przeprowadzono sekwencyjnie z użyciem zamrożonych komórek uzyskanych przed przeszczepieniem. Porównanie bezpośredniego porównania surowicy biorcy limfocyty dawców przeprowadzono przez pomiar cytotoksyczności, testów cytometrii przepływowej lub obu. Przeciwciała przeciwko HL Antidonor wykrywano za pomocą testu immunoenzymatycznego (ELISA) na oczyszczonych antygenach HLA (One Lambda).
Analiza przepływu-cytometrycznego
Przeprowadzono analizę cytometrii przepływowej krwi za pomocą cytometru przepływowego LSR II (BD Biosciences), jak to opisano w innym miejscu.16 Chimeryzm oceniano przy użyciu przeciwciał monoklonalnych HLA specyficznych dla HLA (One Lambda) w celu wykrycia dawcy i biorcy leukocytów, a także za pomocą testów reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) zmiennych zmiennych krótkich powtórzeń tandemowych.
Pomiar poziomów mRNA wewnątrznerkowego
Całkowity RNA wyizolowano z próbek pobranych z biopsji nerki i poddano odwrotnej transkrypcji do komplementarnego DNA (cDNA). Startery oligonukleotydowe i fluorogenne sondy zaprojektowano i zsyntetyzowano do pomiaru mRNA dla FOXP3, granzyme B i rybosomalnego RNA 18S (rRNA) (patrz Tabela 2 Dodatku Aneks). Pomiar poziomów mRNA przeprowadzono za pomocą testów PCR ilościowych z przedwzmacnianiem w czasie rzeczywistym (patrz protokół PCR w dodatkowym dodatku), z poziomami transkryptu znormalizowanymi do numerów kopii rSNA 18S i przekształconymi w log. 18
Biopsje Surveillance
Ryc. 1. Ryc. 1. Kliniczny przebieg pacjentów z tolerancją na przeszczepy nerek. W panelu A poziomy seryjnego kreatyniny u pacjentów 1, 2, 4 i 5 są oznaczone na żółto, a wycofanie leków immunosupresyjnych pokazano jako zwężające się paski powyżej każdej krzywej kreatyniny. Strzałki wskazują czas, w którym pobierano próbki alloprzeszczepu z tych czterech pacjentów. Aby przeliczyć wartości dla kreatyniny na mikromole na litr, pomnóż przez 88,4. Panel B pokazuje ostatnie próbki biopsji protokolarnych od każdego z tych czterech pacjentów (otrzymanych odpowiednio w dniach 1135, 1087, 731 i 666) (kwas nadjodowy-Schiff). Odkrycia we wszystkich próbkach mieściły się w granicach normy, z wyjątkiem próbki od Pacjenta 4, która wykazała duplikację segmentowej kłębuszkowej błony podstawnej i odkładanie C4d (patrz Fig.
[podobne: fluoryzacja zębów cena, niedobór boru, zespół aspergera warszawa ]

Powiązane tematy z artykułem: fluoryzacja zębów cena niedobór boru zespół aspergera warszawa